Méthodes de dosage des acides aminés
Certaines méthodes dosent tous les acides aminés d'autres seront plus spécifiques de certains acides aminés
Methode de Kjeldhal
Méthode de réference pour le dosage des molécules azotées (acides aminés ; protéines)
Méthode pH-métrique
La méthode pH métrique permet de doser les acides aminés à l'aide d'une base de concentration connue
On trouve ainsi le point équivalent et on détérmine donc la concentration de l'acide aminé dosé
Pour voir une vidéo sur le principe du dosage pH-métrique c'est là : http://www.leprofduweb.com/terminale/s/physique_-_chimie/les-dosages/dosage-par-titrage-ph-metrique
On trouve ainsi le point équivalent et on détérmine donc la concentration de l'acide aminé dosé
Pour voir une vidéo sur le principe du dosage pH-métrique c'est là : http://www.leprofduweb.com/terminale/s/physique_-_chimie/les-dosages/dosage-par-titrage-ph-metrique
Methode conductimétrique
Les acides aminés étant porteurs de charges électriques, on peut réaliser des mesures de conductances et faire des dosages par conductimétrie.
Vidéo ( durée : 2' ) Principe des dosages par conductimétrie
Vidéo ( durée : 2' ) Principe des dosages par conductimétrie
Méthode colorimétrique
Plusieurs méthodes colorimétrique existent pour doser n'importe lequel des acides aminés :
Dosage colorimétrique à la ninhydrine
Une vidéo qui explique le principe général des dosages spectrophotométriques (durée : 7' )
- Le dosage à la ninhydrine
- Le dosage de Sanger (avec le DNFB)
- Le dosage d'Edman
Dosage colorimétrique à la ninhydrine
Une vidéo qui explique le principe général des dosages spectrophotométriques (durée : 7' )
Méthode Fluorimétrique
Méthode qui consiste à rajouter un composé fluorescent qui se fixe sur le groupement alpha-amine, on utilise souvent le Chlorure de dansyle.
- Rq: méthode plutôt utilisée lors de l'analyse des séquences des protéines
Méthode HPLC
La Chromatographie Liquide Haute Performance est devenue une méthode rapide pour le dosage des acides aminés
Méthode absorption UV
Trois acides aminés ont la capacité d'absorber la lumière dans les UV, ce sont les acides aminés aromatiques :
- La Tyrosine (Tyr)
- Le Tryptophane (Trp)
- La Phenylalanine (Phe)
Méthodes colorimétriques spécifiques
Plusieurs dosages existent qui sont spécifiques du groupement de la chaine latérale R:
- Méthode de Folin-Ciocalteu: spécifique de Tyr
- Méthode de Sakaguchi, spécifique d'Arg
Méthodes enzymatiques
Les méthodes de dosage enzymatique de substrat sont utilisés, elles utilisent la spécificité vis à vis des acides aminés
- EX: Utilisation de l'ALanine Aminotransférase pour doser Glu ou Ala